ГОСТ 8756.22-80
МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ
ПРОДУКТЫ ПЕРЕРАБОТКИ ПЛОДОВ
И ОВОЩЕЙ
МЕТОД ОПРЕДЕЛЕНИЯ КАРОТИНА
Издание официальное
Москва
Стандартинформ
2010
УДК 664.8/.9:547.979.8.06:006.354
МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ
Группа Н59
СТАНДАРТ
ПРОДУКТЫ ПЕРЕРАБОТКИ ПЛОДОВ И ОВОЩЕЙ
Метод определения каротина
Fruit and vegetable products.
Method for determination of carotene
ГОСТ
8756.22-80
МКС 67.080.01 ОКСТУ 9109
Дата введения 01.01.81
Настоящий стандарт распространяется на плодоовощные консервированные продукты и устанавливает метод определения каротина.
Метод основан на фотометрическом определении массовой концентрации каротина в растворе, полученном после экстрагирования каротина из продуктов органическим растворителем и очищенном от сопутствующих красящих веществ с помощью колоночной хроматографии. Нижний предел определения 0,1 мкг/см3.
1. МЕТОД ОТБОРА ПРОБ
1.1. Отбор проб и подготовка их к испытаниям — по ГОСТ 26313 и ГОСТ 26671.
(Измененная редакция, Изм. № 1, 2).
2. АППАРАТУРА, РЕАКТИВЫ, МАТЕРИАЛЫ
2.1. Для проведения испытания используют следующие аппаратуру, реактивы и материалы:
— фотоэлектроколориметр или спектрофотометр, обеспечивающий измерение при длине волны 450 нм и абсолютной погрешностью измерения коэффициента пропускания не более 1 %;
— весы лабораторные по ГОСТ 24104* с наибольшим пределом взвешивания 200 г, с поверочной ценой деления 2,0 мг;
— весы лабораторные по ГОСТ 24104* с наибольшим пределом взвешивания 500 г, с поверочной ценой деления 5,0 мг;
— электрошкаф сушильный лабораторный с диапазоном нагрева от 40 до 200 °С, обеспечивающий поддержание заданной температуры в пределах ± 5 °С;
— испаритель ротационный ИР-1М;
— насос водоструйный по ГОСТ 25336 или насос Комовского;
— колбы с тубусом для фильтрования под вакуумом по ГОСТ 25336, вместимостью 250 или 500 см3;
— ступку фарфоровую по ГОСТ 9147;
— фильтры стеклянные по ГОСТ 25336;
— воронки диаметром 36 или 56 мм и воронки делительные цилиндрические, вместимостью 100 или 200 см3 по ГОСТ 25336;
— палочки стеклянные по ГОСТ 21400;
— стаканы типов В и Н по ГОСТ 25336, вместимостью 50 см3;
— колбы мерные II класса по ГОСТ 1770, вместимостью 25, 50 и 100 см3’
— пипетки по НТД, вместимостью 1, 5 см3 и 10 см3;
* С 1 июля 2002 г. действует ГОСТ 24104-2001. С 1 января 2010 г. на территории Российской Федерации действует ГОСТ Р 53228-2008.
Издание официальное
★
Перепечатка воспрещена
© Издательство стандартов, 1980 © СТАНДАРТИНФОРМ, 2010
ГОСТ 8756.22-80 С. 2
МЕТОД ОПРЕДЕЛЕНИЯ КАРОТИНА
Издание официальное
Москва
Стандартинформ
2010
УДК 664.8/.9:547.979.8.06:006.354
МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ
Группа Н59
СТАНДАРТ
ПРОДУКТЫ ПЕРЕРАБОТКИ ПЛОДОВ И ОВОЩЕЙ
Метод определения каротина
Fruit and vegetable products.
Method for determination of carotene
ГОСТ
8756.22-80
МКС 67.080.01 ОКСТУ 9109
Дата введения 01.01.81
Настоящий стандарт распространяется на плодоовощные консервированные продукты и устанавливает метод определения каротина.
Метод основан на фотометрическом определении массовой концентрации каротина в растворе, полученном после экстрагирования каротина из продуктов органическим растворителем и очищенном от сопутствующих красящих веществ с помощью колоночной хроматографии. Нижний предел определения 0,1 мкг/см3.
1. МЕТОД ОТБОРА ПРОБ
1.1. Отбор проб и подготовка их к испытаниям — по ГОСТ 26313 и ГОСТ 26671.
(Измененная редакция, Изм. № 1, 2).
2. АППАРАТУРА, РЕАКТИВЫ, МАТЕРИАЛЫ
2.1. Для проведения испытания используют следующие аппаратуру, реактивы и материалы:
— фотоэлектроколориметр или спектрофотометр, обеспечивающий измерение при длине волны 450 нм и абсолютной погрешностью измерения коэффициента пропускания не более 1 %;
— весы лабораторные по ГОСТ 24104* с наибольшим пределом взвешивания 200 г, с поверочной ценой деления 2,0 мг;
— весы лабораторные по ГОСТ 24104* с наибольшим пределом взвешивания 500 г, с поверочной ценой деления 5,0 мг;
— электрошкаф сушильный лабораторный с диапазоном нагрева от 40 до 200 °С, обеспечивающий поддержание заданной температуры в пределах ± 5 °С;
— испаритель ротационный ИР-1М;
— насос водоструйный по ГОСТ 25336 или насос Комовского;
— колбы с тубусом для фильтрования под вакуумом по ГОСТ 25336, вместимостью 250 или 500 см3;
— ступку фарфоровую по ГОСТ 9147;
— фильтры стеклянные по ГОСТ 25336;
— воронки диаметром 36 или 56 мм и воронки делительные цилиндрические, вместимостью 100 или 200 см3 по ГОСТ 25336;
— палочки стеклянные по ГОСТ 21400;
— стаканы типов В и Н по ГОСТ 25336, вместимостью 50 см3;
— колбы мерные II класса по ГОСТ 1770, вместимостью 25, 50 и 100 см3’
— пипетки по НТД, вместимостью 1, 5 см3 и 10 см3;
* С 1 июля 2002 г. действует ГОСТ 24104-2001. С 1 января 2010 г. на территории Российской Федерации действует ГОСТ Р 53228-2008.
Издание официальное
★
Перепечатка воспрещена
© Издательство стандартов, 1980 © СТАНДАРТИНФОРМ, 2010
ГОСТ 8756.22-80 С. 2
Издание официальное
|
Москва Стандартинформ 2010 |
УДК 664.8/.9:547.979.8.06:006.354
МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ
Группа Н59
СТАНДАРТ
ПРОДУКТЫ ПЕРЕРАБОТКИ ПЛОДОВ И ОВОЩЕЙ
Метод определения каротина
Fruit and vegetable products.
Method for determination of carotene
ГОСТ
8756.22-80
МКС 67.080.01 ОКСТУ 9109
Дата введения 01.01.81
Настоящий стандарт распространяется на плодоовощные консервированные продукты и устанавливает метод определения каротина.
Метод основан на фотометрическом определении массовой концентрации каротина в растворе, полученном после экстрагирования каротина из продуктов органическим растворителем и очищенном от сопутствующих красящих веществ с помощью колоночной хроматографии. Нижний предел определения 0,1 мкг/см3.
1. МЕТОД ОТБОРА ПРОБ
1.1. Отбор проб и подготовка их к испытаниям — по ГОСТ 26313 и ГОСТ 26671.
(Измененная редакция, Изм. № 1, 2).
2. АППАРАТУРА, РЕАКТИВЫ, МАТЕРИАЛЫ
2.1. Для проведения испытания используют следующие аппаратуру, реактивы и материалы:
— фотоэлектроколориметр или спектрофотометр, обеспечивающий измерение при длине волны 450 нм и абсолютной погрешностью измерения коэффициента пропускания не более 1 %;
— весы лабораторные по ГОСТ 24104* с наибольшим пределом взвешивания 200 г, с поверочной ценой деления 2,0 мг;
— весы лабораторные по ГОСТ 24104* с наибольшим пределом взвешивания 500 г, с поверочной ценой деления 5,0 мг;
— электрошкаф сушильный лабораторный с диапазоном нагрева от 40 до 200 °С, обеспечивающий поддержание заданной температуры в пределах ± 5 °С;
— испаритель ротационный ИР-1М;
— насос водоструйный по ГОСТ 25336 или насос Комовского;
— колбы с тубусом для фильтрования под вакуумом по ГОСТ 25336, вместимостью 250 или 500 см3;
— ступку фарфоровую по ГОСТ 9147;
— фильтры стеклянные по ГОСТ 25336;
— воронки диаметром 36 или 56 мм и воронки делительные цилиндрические, вместимостью 100 или 200 см3 по ГОСТ 25336;
— палочки стеклянные по ГОСТ 21400;
— стаканы типов В и Н по ГОСТ 25336, вместимостью 50 см3;
— колбы мерные II класса по ГОСТ 1770, вместимостью 25, 50 и 100 см3’
— пипетки по НТД, вместимостью 1, 5 см3 и 10 см3;
* С 1 июля 2002 г. действует ГОСТ 24104-2001. С 1 января 2010 г. на территории Российской Федерации действует ГОСТ Р 53228-2008.
Издание официальное
★
Перепечатка воспрещена
© Издательство стандартов, 1980 © СТАНДАРТИНФОРМ, 2010
— трубка стеклянная для хроматографической колонки длиной 200—250 мм, диаметром широкого конца 15 мм, суженного — 5 мм;
— пробирки типов П1 и П2 по ГОСТ 25336;
— эксикатор по ГОСТ 25336;
— ацетон по ГОСТ 2603;
— эфир петролейный или бензин авиационный по ГОСТ 1012 с температурой кипения 70— 90 °С, или гексан;
— натрий сернокислый безводный по ГОСТ 4166, прокаленный в течение 1 ч, при 100 °С;
— алюминия окись безводная, ч. д. а., для хроматографии, размер частиц (86 ± 5) мкм, нейтральная, или окись алюминия по Брокману II, нейтральная;
— магния окись по ГОСТ 4526;
— спирт этиловый ректификованный по ГОСТ 59621;
— калия гидроокись, х. ч., раствор с массовой долей 50 %; раствор с массовой долей 10 % в этиловом спирте, свежеприготовленный;
— (1-каротин, стандартный раствор или азобензол, ч. д. а., или калия бихромат, х. ч. по ГОСТ 4220;
— воду дистиллированную по ГОСТ 6709;
— песок кварцевый по ГОСТ 7031, прокаленный;
— вату медицинскую гигроскопическую по ГОСТ 5556;
— бумагу фильтровальную лабораторную по ГОСТ 12026;
— эфир этиловый;
— кислоту аскорбиновую;
— фенолфталеин, раствор с массовой долей 1 % в этиловом спирте.
(Измененная редакция, Изм. № 1, 2).
3. ПОДГОТОВКА К ИСПЫТАНИЮ
3.1. Приготовление стандартного раствора
10 мг кристаллического каротина растворяют в гексане в мерной колбе вместимостью 100 см3 и доводят до метки растворителем. Перед построением градуировочного графика готовят рабочий раствор следующим образом: 1 см3 стандартного раствора разбавляют до 100 см3 гексаном; 1 см3 такого раствора содержит 1 мкг каротина;
или 14,5 мг азобензола, перекристаллизованного из спиртового раствора, растворяют в 50 см3 этилового спирта и доводят объем до 100 см3; 1см3 такого раствора по окраске соответствует 2,35 мкг каротина в 1 см3;
или 36 мг бихромата калия растворяют в воде в мерной колбе вместимостью 100 см3 и доводят объем до метки; 1 см3 такого раствора по окраске соответствует 2,08 мкг (1-каротина в 1 см3.
(Измененная редакция, Изм. № 2).
3.2. Приготовление адсорбента
Порцию окиси алюминия (или магния) высушивают в течение 60 мин при температуре 180 °С. Добавляют 1 % дистиллированной воды, встряхивают до получения однородной массы в закрытой банке. В случае плохого разделения, адсорбент не увлажняют и используют сразу после высушивания.
(Измененная редакция, Изм. № 1).
3.3. Приготовление адсорбционной колонки
В нижнюю часть стеклянной трубки для хроматографической колонки, вставленной в пробку, помещают небольшой кусочек ваты. Трубку наполняют окисью алюминия или окисью магния на высоту 5—7 см. В качестве обезвоживающего вещества сверху насыпают безводный сернокислый натрий высотой слоя 2 см. Трубку вставляют в колбу для отсасывания и смачивают растворителем, используемым для экстракции каротина.
3.4. Построение градуировочного графика
Готовят серию растворов сравнения. Для этого в ряд пробирок наливают 1,0; 1,5; 2,0; 2,5; 3,0; 3,5; 4,0 см3 свежеприготовленного рабочего раствора каротина и доводят объем растворов до 10 см3 гексаном. Полученные растворы содержат соответственно 0,10; 0,15; 0,20; 0,25; 0,30; 0,35; 0,40 мкг
каротина в 1 см3. Измеряют на спектрофотометре или фотоэлектроколориметре оптическую плотность полученных растворов по отношению к гексану в кюветах с расстоянием между рабочими гранями 1 см при длине волны 450 нм. Строят график зависимости оптической плотности раствора от массовой концентрации каротина (мкг/см3) D =/(с).
При отсутствии кристаллического каротина градуировочный график строят, используя стандартный раствор азобензола или бихромата калия. При использовании азобензола оптическую плотность растворов сравнения измеряют по отношению к спирту, а бихромата калия по отношению к воде при длине волны 450 нм.
Построение градуировочного графика повторяют не реже одного раза в 6 мес.
(Измененная редакция, Изм. № 2).
4. ПРОВЕДЕНИЕ ИСПЫТАНИЯ
4.1. Экстракция каротина
Из пробы консервированного продукта берут в ступку навеску массой 1—3 г (в зависимости от предполагаемого содержания каротина) с погрешностью не более ± 0,01 г. Растирают в ступке с равным количеством кварцевого песка и 5—7 см3 ацетона. Ацетоновую вытяжку, не затрагивая осадка, фильтруют в делительную воронку через стеклянный фильтр. Экстракцию проводят до обесцвечивания последней порции ацетона. Ацетоновый фильтрат встряхивают в делительной воронке с 15 см3 второго экстрагента, в качестве которого используют петролейный эфир, бензин или гексан. Каротин переходит из нижнего ацетонового в верхний слой второго экстрагента. Если после встряхивания слои полностью не разделяются, добавляют 1—2 см3 воды. После разделения слоев нижний водоацетоновый слой отбрасывают, а верхний слой промывают водой до полного удаления ацетона.
Жидкие продукты (соки, сиропы) в количестве 10,0—20,0 г сразу вносят в делительную воронку с 20 см3 ацетона. Экстракт встряхивают в делительной воронке и добавляют 15 см3 гексана. Встряхивают осторожно во избежание образования эмульсии.
В продуктах, содержащих жир свыше 5 %, проводят горячее омыление жира. Пробу продукта, растертую с песком, помещают в круглодонную колбу с обратным холодильником, добавляют около 1 г аскорбиновой кислоты и 30 см3 раствора гидроокиси калия в этиловом спирте. Смесь доводят до кипения на водяной бане и выдерживают в течение 30 мин. После охлаждения содержимое количественно переносят в делительную воронку, ополаскивая колбу 20 см3 воды. Затем экстрагируют каротин путем добавления гексана (бензина, петролейного эфира) порциями по 5—7 см3 при встряхивании до обесцвечивания последней порции. Собирают экстракты в другую делительную воронку и промывают водой до отсутствия щелочной реакции по фенолфталеину, тщательно сливая воду.
4.2. Очистка экстракта каротина
Экстракт каротина, полученный по и. 4.1, пропускают через адсорбционную колонку со скоростью 1,0—1,5 см3 в минуту. Колонку промывают растворителем, используемым для второй экстракции до тех пор, пока не начнет выходить бесцветный элюат. На колонке остаются красящие вещества, адсорбционная способность которых выше, чем у каротина. Элюат каротина переносят в мерную колбу на 25 или 50 см3, доводят до метки растворителем и определяют в нем концентрацию каротина на фотоэлектроколориметре или спектрофотометре при длине волны 450 нм.
В случае неотделения (1-каротина в растворитель добавляют 1—2 % ацетона.
При анализе продуктов из моркови и моркови в смеси с компонентами, не содержащими (1-каротин, очистку экстракта на колонке не производят.
4.1, 4.2. (Измененная редакция, Изм. № 1, 2).
4.3. Определение массовой концентрации каротина
Измеряют оптическую плотность исследуемого раствора на фотоэлектроколориметре или спектрофотометре при длине волны 450 нм, в кюветах с расстоянием между рабочими гранями 10 мм против чистого растворителя.
По градуировочному графику находят массовую концентрацию каротина (мкг/см3). Если оптическая плотность исследуемого раствора превышает 0,45, делают соответствующее разведение.
72
ГОСТ 8756.22-80 С. 4
5. ОБРАБОТКА РЕЗУЛЬТАТОВ
5.1. Массовую долю каротина (Ж) в процентах вычисляют по формуле
А = С ‘ V 10000 ■т ’
где С — массовая концентрация каротина, определенная по градуировочному графику, мкг/см3; V— объем элюата каротина (и. 4.2), см3; т — масса навески продукта, г.
Вычисления единичных измерений проводят до пятого десятичного знака.
5.2. За окончательный результат испытания принимают среднеарифметическое результатов двух параллельных определений, если расхождение между ними не превышает 0,4 • 10-3 % при массовой доле каротина не более 5 • 10-3 и 1 • 10-3 % при массовой доле каротина более 5 • 10-3 % (Р= 0,95).
(Измененная редакция, Изм. № 1).
73
ИНФОРМАЦИОННЫЕ ДАННЫЕ
1. РАЗРАБОТАН И ВНЕСЕН Министерством пищевой промышленности СССР РАЗРАБОТЧИКИ
Г.М. Евстигнеев; З.В. Левина, канд. техн. наук; А.И. Любивая; Е.И. Чадина
2. УТВЕРЖДЕН И ВВЕДЕН В ДЕЙСТВИЕ Постановлением Государственного комитета СССР по стандартам от 06.03.80 № 1034
3. ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ
4. Стандарт полностью соответствует СТ СЭВ 6519—88
5. ССЫЛОЧНЫЕ НОРМАТИВНО-ТЕХНИЧЕСКИЕ ДОКУМЕНТЫ
|
Обозначение НТД, на который дана ссылка |
Номер пункта |
Обозначение НТД, на который дана ссылка |
Номер пункта |
|
ГОСТ 1012-72 |
2.1 |
ГОСТ 7031-75 |
2.1 |
|
ГОСТ 1770-74 |
2.1 |
ГОСТ 9147-80 |
2.1 |
|
ГОСТ 2603-79 |
2.1 |
ГОСТ 12026-76 |
2.1 |
|
ГОСТ 4166-76 |
2.1 |
ГОСТ 21400-75 |
2.1 |
|
ГОСТ 4220-75 |
2.1 |
ГОСТ 24104-88 |
2.1 |
|
ГОСТ 4526-75 |
2.1 |
ГОСТ 25336-82 |
2.1 |
|
ГОСТ 5556-81 |
2.1 |
ГОСТ 26313-84 |
1.1 |
|
ГОСТ 5962-67 |
2.1 |
ГОСТ 26671-85 |
1.1 |
|
ГОСТ 6709-72 |
2.1 |
|
|
6. Ограничение срока действия снято по протоколу № 5—94 Межгосударственного совета по стандартизации, метрологии и сертификации (ИУС 11-12—94)
7. ИЗДАНИЕ (апрель 2010 г.) с Изменениями № 1, 2, утвержденными в июле 1985 г., ноябре 1989 г. (ИУС 10-85, 2-90)
74
1
На территории Российской Федерации действует ГОСТ Р 51652-2000.
71