ФЕДЕРАЛЬНОЕ АГЕНТСТВО |
||
|
НАЦИОНАЛЬНЫЙ |
ГОСТ Р |
СРЕДСТВА ЛЕКАРСТВЕННЫЕ ДЛЯ ЖИВОТНЫХ,
КОРМА, КОРМОВЫЕ ДОБАВКИ
Определение массовой доли селена
методом атомно-абсорбционной спектрометрии
Москва Стандартинформ 2009 |
Предисловие
Цели и принципы стандартизации в Российской Федерации установлены Федеральным законом от 27 декабря 2002 г. № 184-ФЗ «О техническом регулировании», а правила применения национальных стандартов Российской Федерации – ГОСТ Р 1.0-2004 «Стандартизация в Российской Федерации. Основные положения»
Сведения о стандарте
1 РАЗРАБОТАН Федеральным государственным учреждением «Всероссийский государственный Центр качества и стандартизации лекарственных средств для животных и кормов» (ФГУ «ВГНКИ»)
2 ВНЕСЕН Техническим комитетом по стандартизации ТК 335 «Методы испытаний агропромышленной продукции на безопасность»
3 УТВЕРЖДЕН Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 4 июня 2009 г. № 183-ст
4 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ
Информация об изменениях к настоящему стандарту публикуется в ежегодно издаваемом информационном указателе «Национальные стандарты», а текст изменений и поправок – в ежемесячно издаваемых информационных указателях «Национальные стандарты». В случае пересмотра (замены) или отмены настоящего стандарта соответствующее уведомление будет опубликовано в ежемесячно издаваемом информационном указателе «Национальные стандарты». Соответствующая информация, уведомление и тексты размещаются также в информационной системе общего пользования – на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет
СОДЕРЖАНИЕ
1 Область применения 2 Нормативные ссылки 3 Сущность метода 4 Средства измерений, вспомогательное оборудование, реактивы 5 Порядок подготовки к проведению испытания 5.1 Отбор проб 5.2 Подготовка прибора к работе и условия выполнения измерений 5.3 Приготовление вспомогательных растворов 5.4 Приготовление градуировочных растворов 5.5 Градуировка прибора 5.6 Контроль стабильности градуировочной характеристики 6 Порядок проведения испытания 6.1 Микроволновая минерализация проб 6.2 Измерение атомного поглощения селена 7 Обработка и оформление результатов испытания 8 Метрологические характеристики 9 Контроль качества результатов измерений 10 Требования к квалификации операторов Библиография |
НАЦИОНАЛЬНЫЙ СТАНДАРТ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
СРЕДСТВА ЛЕКАРСТВЕННЫЕ ДЛЯ ЖИВОТНЫХ, Определение массовой доли селена
|
Дата введения – 2010-01-01
1 Область применения
Настоящий стандарт распространяется на средства лекарственные для животных, корма и кормовые добавки и устанавливает метод гидридной атомно-абсорбционной спектрометрии с использованием способа микроволновой минерализации проб при определении массовых долей селена в диапазоне измерений от 0,25 до 1,50 млн-1 (мг/кг).
2 Нормативные ссылки
В настоящем стандарте использованы нормативные ссылки на следующие стандарты:
ГОСТ Р ИСО 5725-6-2002 Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 6. Использование значений точности на практике
ГОСТ Р 52684-2006 Средства лекарственные для животных. Правила приемки, методы отбора проб
ГОСТ 177-88 Водорода перекись. Технические условия
ГОСТ 1770-74 (ИСО 1042-83, ИСО 4788-80) Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Общие технические условия
ГОСТ 4328-77 Реактивы. Натрия гидроокись. Технические условия
ГОСТ 5457-75 Ацетилен растворенный и газообразный технический. Технические условия
ГОСТ 6691-77 Реактивы. Карбамид. Технические условия
ГОСТ 6709-72 Вода дистиллированная. Технические условия
ГОСТ 10157-79 Аргон газообразный и жидкий. Технические условия
ГОСТ 11125-84 Кислота азотная особой чистоты. Технические условия
ГОСТ 13496.0-80 Комбикорма, сырье. Методы отбора проб
ГОСТ 13867-68 Продукты химические. Обозначение чистоты
ГОСТ 14261-77 Кислота соляная особой чистоты. Технические условия
ГОСТ 14919-83 Электроплиты, электроплитки и жарочные электрошкафы бытовые. Общие технические условия
ГОСТ 24104-2001 Весы лабораторные. Общие технические требования
ГОСТ 25336-82 Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры
ГОСТ 29227-91 (ИСО 835-1-81) Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки градуированные. Часть 1. Общие требования
Примечание – При пользовании настоящим стандартом целесообразно проверить действие ссылочных стандартов в информационной системе общего пользования – на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет или по ежегодно издаваемому информационному указателю «Национальные стандарты», который опубликован по состоянию на 1 января текущего года, и по соответствующим ежемесячно издаваемым информационным указателям, опубликованным в текущем году. Если ссылочный стандарт заменен (изменен), то при пользовании настоящим стандартом следует руководствоваться заменяющим (измененным) стандартом. Если ссылочный стандарт отменен без замены, то положение, в котором дана ссылка на него, применяется в части, не затрагивающей эту ссылку.
3 Сущность метода
3.1 Метод основан на образовании гидрида селена после кислотной минерализации образца в закрытой системе микроволновой печи с последующим восстановлением Se (IV) в газообразный гидрид селена боргидридом натрия, введении гидрида селена в нагретый кварцевый атомизатор и измерении величины атомного поглощения селена (аналитическая линия 196,0 нм), образующегося при термическом разложении гидрида селена.
3.2 В процессе подготовки пробы соединения селена переводятся в соединения Se (IV), которые количественно восстанавливаются до гидрида.
3.3 При определении селена в водорастворимых лекарственных средствах кислотная минерализация не требуется.
4 Средства измерений, вспомогательное оборудование, реактивы
4.1 Для определения массовой доли селена используют следующие средства измерений и вспомогательное оборудование:
– пламенный атомно-абсорбционный спектрометр любой марки, работающий в диапазоне длин волн 185-900 нм с относительным среднеквадратическим отклонением случайной составляющей погрешности результатов измерения, не превышающим 8 %, укомплектованный спектральной лампой, которая излучает спектр селена, и снабженный системой генерации гидридов, включающий в себя аналитический модуль или приставку для генерации гидридов, атомизатор – кварцевую ячейку и программное обеспечение, управляющее работой системы генерации гидридов. Указанное программное обеспечение может быть составной частью программного обеспечения к спектрометру;
– весы лабораторные высокого или специального класса точности с наибольшим пределом взвешивания 200 г и ценой поверочного деления 0,1 мг по ГОСТ 24104;
– печь микроволновую лабораторную для экспрессной подготовки образцов с мощностью 1600 Вт и частотой магнетрона 220-240 V/50 Гц;
– государственные стандартные образцы состава водного раствора ионов Se (IV) с погрешностью аттестованного значения не более 1 % при доверительной вероятности Р = 0,95, Массовые концентрации в стандартном образце раствора ионов селена должны быть не менее 0,05 мг/см3 и не более 1,00 мг/см3;
– баня ультразвуковая;
– плитка электрическая по ГОСТ 14919;
– баня водяная лабораторная.
4.2 Для определения массовой доли селена используют следующие лабораторную посуду и материалы:
– пипетки градуированные по ГОСТ 29227;
– колбы 1-50 (100; 500) – 2 по ГОСТ 1770;
– цилиндры 1(2,3) – 100 – 1 по ГОСТ 1770;
– воронки ВФ-1(2) – 60 – ПОР 500 ТХС по ГОСТ 25336;
– фильтры обеззоленные с синей лентой, диаметром от 7 до 10 см по [1].
4.3 Для определения массовой доли селена используют следующие реактивы:
– натрия боргидрид, х.ч. по [2];
– натрия гидроокись по ГОСТ 4328;
– карбамид по ГОСТ 6691;
– аргон газообразный в баллоне, снабженном редуктором по ГОСТ 10157;
– ацетилен технический, растворенный и газообразный по ГОСТ 5457;
– кислоту азотную особой чистоты по ГОСТ 11125;
– кислоту соляную особой чистоты по ГОСТ 14261;
– перекись водорода по ГОСТ 177;
– воду дистиллированную по ГОСТ 6709;
4.4 Все реактивы должны относиться к подгруппе чистоты 1 (ос.ч.) или 2 (х.ч.) по ГОСТ 13867.
4.5 Допускается применение других средств измерений и вспомогательного оборудования с метрологическими и техническими характеристиками, а также реактивов по качеству не ниже указанных.
5 Порядок подготовки к проведению испытания
5.1 Отбор проб
Отбор проб лекарственных средств для животных, кормов и кормовых добавок проводят в соответствии с ГОСТ Р 52684 и ГОСТ 13496.0.
5.2 Подготовка прибора к работе и условия выполнения измерений
5.2.1 Подготовку атомно-абсорбционного спектрометра к работе и оптимизацию условий измерения проводят в соответствии с руководством (инструкцией) по эксплуатации прибора.
При этом должны быть соблюдены следующие условия:
– температура воздуха – от 10 °С до 35 °С;
– атмосферное давление – от 630 до 800 мм рт. ст. (от 840 до 1067 ГПа);
– влажность воздуха при температуре 25 °С – от 30 % до 80 %. Рабочая длина волны при определении селена – 196,0 нм.
5.2.2 Систему генерации подготавливают к работе в соответствии с руководством (инструкцией) по эксплуатации системы и/или прибора.
5.3 Приготовление вспомогательных растворов
5.3.1 Приготовление раствора соляной кислоты
При приготовлении вспомогательных растворов для канала кислоты используют раствор соляной кислоты молярной концентрации 2 моль/дм3. Для этого в мерную колбу вместимостью 500 см3 отбирают мерным цилиндром 93 см3 концентрированной соляной кислоты с плотностью 1,19 г/см3 и доводят до метки дистиллированной водой.
Срок хранения раствора не ограничен.
5.3.2 Приготовление 0,3 %-ного раствора боргидрида натрия
Для канала восстановителя используют 0,3 %-ный раствор боргидрида натрия в 0,5 %-ном растворе гидроокиси натрия. Для этого 0,5 г гидроокиси натрия помещают в мерную колбу вместимостью 100 см3, растворяют в небольшом количестве дистиллированной воды, затем добавляют 0,3 г боргидрида натрия и перемешивают. После полного растворения доводят до метки дистиллированной водой.
Для анализа используют свежеприготовленный раствор.
5.3.3 Приготовление 20 %-ного раствора карбамида
В мерную колбу вместимостью 100 см3 помещают 20 г карбамида и растворяют в 50 см3 дистиллированной воды. Затем доводят до метки дистиллированной водой и перемешивают. Срок хранения раствора – 1 мес.
5.3.4 Приготовление фонового раствора соляной кислоты
Фоновый раствор соляной кислоты готовят смешиванием 500 см3 концентрированной соляной кислоты с 500 см3 дистиллированной воды. Срок хранения раствора не ограничен.
5.4 Приготовление градуировочных растворов
5.4.1 Приготовление промежуточного раствора селена А
Для приготовления промежуточного раствора А с массовой концентрацией селена 0,1 мг/см3 вскрывают стеклянную ампулу государственного стандартного образца состава водного раствора ионов Se (IV) с массовой концентрацией 1,0 мг/см3, отбирают пипеткой 5 см3 стандартного образца, помещают в мерную колбу вместимостью 50 см3, доводят объем до метки раствором соляной кислоты по 5.3.4 и перемешивают.
Срок хранения раствора – 6 мес.
5.4.2 Приготовление промежуточного раствора селена Б
Для приготовления промежуточного раствора селена Б с массовой концентрацией селена 0,01 мг/см3 помещают 5 см3 промежуточного раствора А в мерную колбу вместимостью 50 см3 и доводят до метки раствором соляной кислоты по 5.3.4.
Срок хранения раствора – 20 дней.
5.4.3 Приготовление промежуточных растворов селена В и Г
Промежуточные растворы селена В и Г с массовой концентрацией 1,0 и 0,1 мг/дм3 соответственно готовят как раствор Б, последовательно разбавляя каждый вновь приготовленный раствор соляной кислотой по 5.3.4.
Растворы В и Г готовят в день проведения анализа.
5.4.4 Приготовление градуировочных растворов селена массовой концентрацией 5,0; 10,0;30; 50 мкг/дм3
В четыре мерные колбы вместимостью 50 см3 отбирают пипеткой 2,5; 5,0; 15,0; 25,0 см3 раствора Г, доводят до метки фоновым раствором соляной кислоты по 5.3.4 и тщательно перемешивают. Растворы готовят непосредственно перед проведением анализа.
5.5 Градуировка прибора
Градуировку атомно-абсорбционного спектрометра проводят в соответствии с руководством (инструкцией) по эксплуатации с использованием градуировочных растворов, приготовленных по 5.4.4. Нуль прибора устанавливают по фоновому раствору соляной кислоты. Градуировочные растворы прокачивают через систему. Регистрируют атомное поглощение каждого раствора три раза и вычисляют среднеарифметическое измеренных значений.
Относительное среднеквадратическое отклонение результатов параллельных измерений градуировочного раствора не должно превышать 10 %. Строят градуировочный график.
Устанавливают градуировочную характеристику, представляющую собой зависимость среднеарифметического значения атомного поглощения от массовой концентрации селена в растворе, мкг/дм3.
5.6 Контроль стабильности градуировочной характеристики
5.6.1 Контроль стабильности градуировочной характеристики проводят ежедневно перед началом работы.
В качестве образца для контроля стабильности градуировочной характеристики используют раствор селена, приготовленного аналогично 5.4.4. Массовую концентрацию селена в образце для контроля стабильности градуировочной характеристики выбирают, исходя из предполагаемого содержания селена в анализируемых пробах.
Регистрируют не менее двух раз атомное поглощение раствора образца для контроля стабильности градуировочной характеристики, вычисляют среднеарифметическое значение и при помощи градуировочной зависимости рассчитывают массовую концентрацию селена.
Градуировочная зависимость признается стабильной, если выполняется условие:
(1)
где СП – измеренное значение массовой концентрации селена в растворе образца для контроля стабильности градуировочной характеристики, мкг/дм3;
СО – действительное значение массовой концентрации селена в растворе образца для контроля стабильности градуировочной характеристики, мкг/дм3.
Если условие (1) не выполняется, то процедуру контроля повторяют. Результаты повторного контроля считают окончательными, градуировку прибора по 5.5 проводят заново.
6 Порядок проведения испытания
6.1 Микроволновая минерализация проб
6.1.1 Для минерализации проб, имеющих в основе неорганическую матрицу (полиминеральные добавки, лекарственные средства, содержащие селен), процедуру проводят в одну стадию с использованием концентрированной азотной кислоты. При минерализации проб с органической матрицей [белково-витаминно-минеральные концентраты (БВМК), комбикорма, корма для мелких домашних животных] процесс проводят с постепенным увеличением давления и второй стадией минерализации с добавлением перекиси водорода.
Для проведения минерализации пробы в закрытой системе используют микроволновую лабораторную печь.
6.1.2 Устанавливают программу проведения минерализации в соответствии с рекомендациями изготовителя микроволновой печи. Например, при использовании микроволновой печи MDS-2000 фирмы СЕМ (США) параметры программы, подобранные по типам кормов и кормовых добавок, выбирают в соответствии с таблицей 1.
Таблица 1
Тип анализируемого образца |
Навеска, г |
Параметры разложения |
|||||
1 стадия (с HNO3) |
2 стадия (с Н2О2) |
||||||
этап |
давление, МПа |
время, мин |
этап |
давление, МПа |
время, мин |
||
Полиминеральные добавки, премиксы, л/с, содержащие селен |
0,8 |
1 2 3 |
0,35 0,70 1,00 |
5 10 10 |
– |
– |
– |
БВМК, комбикорма, корма для непродуктивных животных |
0,5 |
1 2 3 4 5 |
0,35 0,55 0,70 0,90 1,00 |
5 5 8 10 10 |
1 |
0,35 |
10 |
6.1.3 Кислотную минерализацию в микроволновой печи осуществляют в следующем порядке:
– навеску 0,5 или 0,8 г (в зависимости от типа пробы) помещают в стакан-автоклав;
– добавляют 10 см3 концентрированной азотной кислоты и герметизируют сосуд, при необходимости поместив в него датчик контроля давления и/или температуры;
– параллельно проводят минерализацию добавляемых к навеске реактивов для контроля их чистоты (контрольный раствор);
– помещают карусель с автоклавами в печь и проводят разложение в зависимости от выбранной программы для данного типа образца;
– по окончании разложения сосуды охлаждают и вскрывают в соответствии с руководством (инструкцией) изготовителя микроволновой лабораторной печи.
Для образцов с органической матрицей проводят вторую стадию минерализации. Для этого к охлажденной пробе добавляют 2 см3 перекиси водорода, снова закрывают сосуд, помещают в микроволновую печь и вновь подвергают минерализации по выбранной программе.
6.1.4 Для перевода всех форм селена в селен (IV) в колбу вместимостью 50 см3 добавляют 25 см3 концентрированной соляной кислоты и полученный после микроволновой минерализации раствор, фильтруя через обеззоленный фильтр «синяя лента». Добавляют 3 см3 раствора карбамида 20 %-ного по 5.3.3 и нагревают на водяной бане в течение 10 мин при температуре не более 90 °С. Затем раствор дегазируют в ультразвуковой бане и количественно переносят в мерную колбу вместимостью 50 см3, доводят до метки дистиллированной водой и тщательно перемешивают.
6.2 Измерение атомного поглощения селена
Измеряют атомное поглощение селена в минерализатах проб и растворе контрольной пробы на реактивы (см. 6.1.3) три раза. Вычисляют среднеарифметическое измеренных значений в тех же условиях, что и при построении градуировочной характеристики по 5.5. Используя градуировочную характеристику 5.5, вычисляют массовую концентрацию элемента.
7 Обработка и оформление результатов испытания
7.1 Массовую долю селена в пробе С, млн-1 (мг/кг), рассчитывают по формуле
(2)
где С1 – массовая концентрация селена в анализируемом растворе, найденная по градуировочному графику по 5.5, мкг/дм3;
СK– массовая концентрация селена в контрольном растворе 5.4, найденная по градуировочному графику по 5.5, мкг/дм3;
p– коэффициент разбавления пробы;
VK– объем раствора пробы после минерализации по 6.1.3, дм3;
В– масса навески, кг;
1000 – коэффициент пересчета мкг в мг.
За результат измерений принимают среднеарифметическое значение двух параллельных измерений.
7.2 Числовое значение результата анализа должно оканчиваться цифрой того же разряда, что и значение погрешности.
8 Метрологические характеристики
Метод атомно-абсорбционной спектрометрии обеспечивает получение результатов измерений с метрологическими характеристиками, не превышающими значений, приведенных в таблице 2.
Таблица 2
Диапазон измерений, млн-1 (мг/кг) |
Предел повторяемости г, млн-1 (мг/кг) |
Предел воспроизводимости R, млн-1 (мг/кг) |
Границы абсолютной погрешности ±D, млн-1 (мг/кг) |
От 0,25 до 1,50 вкл. |
0,40С* |
0,47С* |
0,35С* |
* С – результат измерений массовой доли селена в пробе по формуле (2). |
9 Контроль качества результатов измерений
Контроль качества результатов измерений в лаборатории предусматривает проведение контроля стабильности результатов измерений с учетом требований ГОСТ Р ИСО 5725-6 (раздел 6).
10 Требования к квалификации операторов
Выполнение измерений может производить химик-аналитик, владеющий техникой атомно-абсорбционного анализа, изучивший инструкцию по работе с соответствующими приборами и освоивший настоящую методику выполнения измерений.
Библиография
[1] ТУ 6-09-1678-95 Фильтры обеззоленные (белая, красная, синяя ленты)
[2] ТУ 1-92-162-90 Натрия боргидрид технический
Ключевые слова: лекарственные средства для животных, корма, кормовые добавки, определение массовой доли селена, метод атомно-абсорбционной спектрометрии, способ микроволнового разложения проб